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PCR检测试剂盒优点
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产品: 浏览次数:46PCR检测试剂盒优点 
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最后更新: 2024-02-27 15:48
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PCR技术的定量原理:

扩增曲线

Real- qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。

Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。

PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据终的PCR产物量不能计算出初始模板量。

荧光染料的优点:

产品仅用于科研使用简便;

可以与任何PCR产物结合;

价格便宜;

荧光染料的缺点:

不能区分不同的双链DNA

引物二聚体会影响检测的敏感性

非特异性产物会影响结果的敏感性

引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说,SYBR Green I方法是一种基础也的Real-time qPCR实验手段。

 

更多:PCR检测试剂盒

http://www.shyskit.com/yansheng-Products-3938525/

https://www.gkzhan.com/st51173/erlist_1145654.html

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